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鼻疽假單胞菌PCR檢測試劑盒廠家

產品簡介

鼻疽假單胞菌PCR檢測試劑盒廠家
上海聯祖生物相關產品:
AFP-L1檢測試劑盒封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
底物請避光保存。

更新時間:2021-03-13
訪問次數:739
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產品名稱

 鼻疽假單胞菌PCR檢測試劑盒廠家

 規格

 50T

 貨號

 LZP7502

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
BDO2,5-二氯苯甲 98%酸鈉 分析標準品

2,3-Butanediol2,6-二氯苯磺酰氯 97%酸鈉 99%

BT4-(三氟甲基)芐溴 98%酸鈉 用于昆蟲細胞培養, ≥99.0%

NPG對溴苯酚 98%對苯醌 97%

DPG溴代異丁烷 98%苯亞磺酸鈉 98%

Dodecal溴烷 99%對甲苯亞磺酸鈉 98%,無物

1,2,6-Hexanetriol2,4-二氯苯酚   CP,98%對甲苯亞磺酸鈉 98%,合物

1-Hexal2,6-二氯苯酚 AR,99.0%三氟磺酸 98%

PPG2,4,6-三溴苯酚 98%三氟磺酸 99%

Glutaraldehyde2,4,6-三氯苯酚 98%三氟磺酸酐 98%

Paraformaldehyde四氫吡喃酮 97%三氟磺酸鐿合物 99.9% metals basis

TCADL(±)-3-氨基-3-苯基酸 98%硫酸氧鈦 synthesis grade

Benzaldehyde2-丁炔酸 98%硫酸氧鈦 93%

OCBA2-丁炔酸乙酯 98%十六胺 90%

Citral針頭式過濾器 孔徑:0.22μm 直徑:13.0mm 800個/箱,100個/每包油胺 C18:80-90%

2,4-DCAD苯甲酰甲酸 98%溴化亞銅 AR,99.0%

2,6-二硝苯(分析標準品,用于環境分析)BLNK (D3P2H) XP® Rabbit mAbMAdCAM-1  粘膜血管定居因子抗體

1,4-二(分析標準品,用于環境分析,>99.9%(GC))BLNK (D3P2H) XP® Rabbit mAbMAdCAM1  粘膜細胞粘附分子1抗體

4,4'-二氨基二苯硫(標準品)SATB1 (P472) AntibodyMad2L2  有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體

二甲氧烷(分析標準品,≥99.8%(GC))TET2 (D6C7K) Rabbit mAb (Mouse Specific)Mad2L1  有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白1抗體

位十二內酯(分析標準品,≥98.5%(GC))CDC73 (A264) AntibodyMAD2  有絲分裂阻滯缺陷蛋白2抗體

精噁唑禾草靈(標準品)CDC73 (D410) AntibodyMAD1  Mad1抗體

6-羥基煙酸(分析標準品,≥98.0%(HPLC))SATB1 (L745) AntibodyMACC1  結腸癌轉移相關蛋白1抗體

正庚(分析標準品,99.8%(GC))cdc25A AntibodyM2-PK/PKM2  小鼠抗酮酸激酶-M2抗體

1-己烯(分析標準品,≥99.5%(GC))Akt (pan) (40D4) Mouse mAb (Sepharose® Bead Conjugate)M2-PK/PKM2  酮酸激酶-M2抗體

正己烷(分析標準品,>99.5%(GC))GFAP (GA5) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)M2-PK (pyruvate Kinase M2)  酮酸激酶-M2
鼻疽假單胞菌PCR檢測試劑盒廠家免疫調節蛋白AIRE抗體Simenine中文名:青藤堿別名:分子式:C19H234

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體5-Methoxycanthin-6-one中文名:5-甲氧基鐵屎米酮別名:分子式:C15H10N2O2

乙醛脫氫酶2型抗體Browniine中文名:別名:Salt form分子式:C25H427

γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體Glabratine中文名:別名:分子式:C27H34N2O9

衰老相關蛋白5抗體Isoboldine中文名:異波爾定堿別名:分子式:C19H214

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