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鮭腎桿菌PCR檢測試劑盒價格

產品簡介

鮭腎桿菌PCR檢測試劑盒價格
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更新時間:2021-03-13
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 鮭腎桿菌PCR檢測試劑盒價格

 英文名稱

 Renibacterium salmoninarumPCR

 貨號

 LZP7221

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
Beryllon I茚三酮,合 AR,95.0%硫酸 CP,98.5%

Beryllon II茚三酮,合 ACS reagent, ≥98.0% (UV)鹽酸苯甲脒,合 98%

Graphite powder5-硝基 98%4-氯苯甲 99.0%

Permutit4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧雜惡二唑 99%4-苯甲 97%

Soda lime4-硝基-7-哌苯并氧雜惡二唑 98%1-氨基茚滿  98%

Sea sand4-肼基-7-硝基-2,1,3-苯并氧雜惡二唑 98%楊 98%

Lipofectamine 2000 Transfection Reagent1,4-哌二乙磺酸 99%1-氨基茚滿  98%

Cinchonine哌-N,N-雙(2-羥基烷磺酸) 99%鹽酸阿霉素 98%

Rhodanine苯甲≥98.5% (GC)(R)-(+)-2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯萘 98%

Diethyl oxalate對二甲苯二聚體 99%(S)-(-)-2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯萘 98%

Iodine對磷酸二鈉 98%(±)-2,2'-雙-(二苯膦基)-1,1'-聯萘 98%

Chinese red5’-磷酸吡哆,一 98%(R)-(-)-1,1'-聯-2-萘酚二(三氟甲磺酸酯)  98%

Bentonite鹽酸吡哆 99%1,1'-聯萘酚-2,2'-雙(三氟磺酸酯)  98%

Boron carbide1,4-哌二乙磺酸二鈉鹽 BC二苯基膦 95%

Boron oxide1,4-哌二乙磺酸倍半鈉鹽 99%(R)-(-)-5,5'-雙[二(3,5-二叔丁基-4-甲氧基苯基)磷]-4,4'-二-1,3

Glass Fiber并五苯 98%(S)-DTBM-SEGPHOS 98%

染料木素/金雀異黃酮ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAbPPM1B  蛋白質磷酸酶1B抗體(PP2Cβ)

染料木素/金雀異黃酮(標準品)Cleaved Caspase-8 (Asp387) (D5B2) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific) (PE Conjugate)PPIL1  親環素相關蛋白1抗體

YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAbPPIG  親環蛋白(親環素)PPIG抗體

(標準品)YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAbPPIB/Cyclophilin B  親環蛋白(親環素)PPIB抗體

木犀草素SYAP1/BSTA AntibodyPPIA/Cyclophilin A  親環蛋白(親環素)PPIA抗體

木犀草素(標準品)LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate)PPHLN1  脈周蛋白1抗體(胃癌抗原蛋白Ga50)

熊果酸SimpleChIP® Human RNU2-1 Promoter PrimersPPARGC1A/PGC1 α  過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗體

熊果酸;烏蘇酸(標準品)PHB2 (E1Z5A) Rabbit mAbPPAR-delta/beta  D型-過氧化酶活化增生受體抗體

香葉木素CdGAP (D6J9G) Rabbit mAbPPAR Gamma  過氧化酶活化增生受體γ抗體

香葉木素(標準品)APC11 (D1E7Q) Rabbit mAbPPAR gamma  過氧化酶活化增生受體γ抗體
鮭腎桿菌PCR檢測試劑盒價格人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TGSF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:250克

人腫瘤特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:30毫升

人腫瘤特異性移植抗原(TSTA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1克

人腫瘤相關抗原(TAA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃,避光250毫克

人腫瘤血管生長因子(TAF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃1克

人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT100毫克
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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