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耶氏肺孢子蟲PCR檢測試劑盒價格

產品簡介

耶氏肺孢子蟲PCR檢測試劑盒價格
上海聯祖生物相關產品:
PYD檢測試劑盒 預冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液稱重后備用*的內源性及外源性因素對DNA氧化損傷的生物標志物

更新時間:2021-03-13
訪問次數:651
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 耶氏肺孢子蟲PCR檢測試劑盒價格

 英文名稱

 Pneumocystis jirovecii PCR

 貨號

 LZP7153

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
OPD-HC1哌啶 Standard for GC, ≥99.5% (GC)苯偶酰 98%

IAM2,6-吡啶二羰酰氯  96%苯甲 Standard for GC,≥99.5%(GC)

Putrescine dihydrochloride亞硝基鐵 CP苯甲 AR,>98.5%(GC)

Formamide醌氫醌 97%苯甲 CP,>98%(GC)

Formamide Deionized磷鉬酸鈉,合 AR苯甲 ACS

DMFA次氯酸鈉溶液 AR,6-14% active chlorine basis苯甲 >99.0% (GC)

Spermine次氯酸鈉 CP,available chlorine 5.5 %苯甲 重蒸餾, ≥99.5%

Spermine tetrahydrochloride次氯酸鈉溶液 ACS,available chlorine 5.00 %DL-苦杏仁酸 CP,98.5%

Spermidine硫代乙酸鈉 AR,80.0%苯乙 99%

Spermidine trihydrochloride硫代乙酸鈉 BR CP,98.0%()

CDC硫代乙酸鈉 98%藍V AR

DCCI亞硝基鐵化鈉 AR,99.0%喹啉黃 70%

DIPCDI無碳酸鈉 AR檸檬酸二氫 AR,98.0%

NEM丁二酸鈉 AR,99.0%香草 AR,99%

HONB亞硝基鐵化鈉 99.98% metals basis香草 ≥99%, FCC, FG

NBS亞磷酸三苯酯 CP,97%天然香蘭素 Natural,≥99%, FCC, FG

氟派利多,氟哌利多(標準品)CYLD (D6O5O) Rabbit mAbRabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗猴IgG

6-疏基嘌呤/6-巰基嘌呤(一合物)Acetyl-Histone H2B (Lys5) (D5H1S) XP® Rabbit mAbRabbit anti-Monkey IgG whole serum  兔抗猴IgG抗血清

撲熱息痛/對乙酰氨基酚Acetyl-Histone H2B (Lys5) (D5H1S) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-Monkey IgG  兔抗猴IgG

撲熱息痛(標準品)STF-1 (D1Z2A) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-MK IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗猴IgM

(R)-1-氨基-3-甲基丁基酸蒎烷二酯三氟醋酸鹽K48-linkage Specific Polyubiquitin (D9D5) Rabbit mAb (HRP Conjugate)Rabbit Anti-MK IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗猴IgM

奧拉帕尼PDBu (Phorbol 12Rabbit Anti-MK IgM/PE  PE標記的兔抗猴IgM

花椒毒素/8-甲氧基補骨脂素/甲氧林PTMScan® Cleaved Caspase Substrate Motif [DE(T/S/A)D] KitRabbit Anti-MK IgM/Cy7  Cy7標記的兔抗猴IgM

花椒毒素/(標準品)Phospho-Chk2 (Thr68) (C13C1) Rabbit mAb (PE Conjugate)Rabbit Anti-MK IgM/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗猴IgM

奎尼丁C/EBP Antibody Sampler KitRabbit Anti-MK IgM/Cy5  Cy5標記的兔抗猴IgM

單月桂酸甘油酯/甘油一月桂酸酯Prostate Specific Membrane Antigen (D7I8E) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-MK IgM/APC  APC標記的兔抗猴IgM
耶氏肺孢子蟲PCR檢測試劑盒價格人絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

人溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

人溶酶體相關膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT100克

人溶血補體(Hc)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

人乳酸脫酶(LDH)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:5克
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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